辽宁省2025届高三金太阳11月联考(126C)生物试题

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基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术：②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【小问1详解】由于限制酶HindIII能识别fat1基因中的核苷酸序列，而限制酶EcoRI和BamHI识别的核苷酸序列位于启动子和终止子之间，所以利用PCR技术扩增fat1基因时，应在两种引物的5端分别加上限制酶EcoRI和BamHI识别与切割的序列。由于电泳技术仅能检测DNA分子的大小，无法确定其碱基序列，所以PCR的产物还需要电泳进一步确定序列。【小问2详解】所构建的重组基因表达载体中除标注出的必需元件目的基因、启动子、终止子外，未标注出的必需元件是启动子，其启动子的作用是①RNA聚合酶的识别和结合部位，②驱动基因转录出mRNA。【小问3详解】大肠杆菌作为受体细胞，需用Ca²+处理使其处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，进而在适宜的条件下将连接产物导入其中。【小问4详解】将重组表达载体转染猪成纤维细胞，另设一组空白对照。48小时后于荧光显微镜下观察到转染重组表达载体的猪成纤维细胞有绿色荧光，而空白对照组无绿色荧光，说明转染成功。然后以转基因细胞为核供体构建克隆胚胎，最终获得转fat1基因猪。第19页/共19页